【摘要】樹立了蔬菜中乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威殘留量氣相色譜同時剖析辦法。采用分散固相萃取技術，在提取液中參加c18、石墨炭黑、psa等吸附劑粉末停止凈化，依據(jù)檢測器選擇溶劑置換，采用db��1701毛細管柱別離，μecd檢測。13種農(nóng)藥的濃度范圍在0.002～0.05mg/kg時，回收率在80%～100%之間、rsd為1%～6%。各農(nóng)藥的檢出限為：氟蟲腈、環(huán)氟菌胺0.002mg/kg；苯氧菊酯、甲草胺、乙草胺0.004mg/kg；多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威0.01mg/kg。該辦法步驟簡單，凈化效果好，具有良好的靈敏度、回收率和重現(xiàn)性。

    　　1、引言

    　　農(nóng)藥殘留和食品安全問題在國際社會遭到普遍關注，食品農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留檢測項目日益增加、限量請求日益嚴厲。在剖析儀器高度開展的今天，樣品的處置技術在農(nóng)藥殘留剖析中占領越來越重要的位置。如今的前處置技術多采用自制填充柱、spe小柱或基質固相分散技術[1,2]。采用填充柱凈化法和基質固相分散技術費時并耗費大量的有機試劑；采用spe小柱凈化，經(jīng)常多種分離運用，招致本錢較高。2003年美國農(nóng)業(yè)部提出了分散型固相萃取技術[3]，關于此凈化辦法，現(xiàn)有文獻[4～6]中大部分只采用psa凈化，psa吸附劑具有弱的陰離子交流才能，有利于吸附樣品基質中的有機酸、糖以及色素，但關于基質復雜的蔬菜凈化效果并不太理想。本辦法在實驗的基礎上創(chuàng)新性的增加了c18、石墨炭黑等吸附劑粉末同時凈化，依據(jù)氣相色譜�拨蘣cd檢測器停止溶劑轉溶，實現(xiàn)了對基質復雜的蔬菜中乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺及茚蟲威等多種農(nóng)藥殘留的快速檢測。

    　　2、實驗部分

    　　2.1儀器和試劑

    　　agilent6890n氣相色譜儀，配μecd檢測器、自動進樣器；渦流混勻器（ika公司）；研磨機（德國gm公司）；離心機（中國安亭公司）；電子天平（梅特勒公司）；均質器（ika公司）。乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威等農(nóng)藥標準品（dr.公司的有證標準物質）；正己烷、丙酮、乙腈均為色譜純；冰醋酸：優(yōu)級純；無水乙酸鈉：剖析純；無水硫酸鎂：剖析純（500℃馬弗爐內(nèi)烘5h，冷卻取出裝瓶備用）；psa粉；c18粉；氨基粉（nh2）；石墨碳黑粉；0.1%冰醋酸/乙腈溶液（移取1mｌ冰醋酸參加1000ml乙腈混勻）。

    　　2.2實驗辦法

    　　2.2.1標準工作液的配制

    　　稱取乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威標準品各10.0mg,用丙酮溶解后，置于13個100ml棕色容量瓶中，并用丙酮定容至刻度，混勻，濃度分別為100mg/l，分別移取以上標準液氟蟲腈、環(huán)氟菌胺(a組)各1.0ml,甲草胺、乙草胺、苯氧菊酯（b組）各2.0ml,多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威（c組）各5.0ml置于100ml棕色容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，a組、ｂ組和ｃ組標準溶液濃度分別為1．０、２．０和５．０mg/l。

    　　2.2.2樣品制備及提取、凈化

    　　稱取樣品適量，置于100ml塑料離心管中，參加0.1%醋酸/乙腈溶液10ml，正己烷5ml，無水硫酸鎂5.0g,無水乙酸鈉2.0g，用玻璃棒充分攪拌均勻，于均質機上高速均質2min，5000r/min高速離心8min，移取全部上清液于15ml塑料離心管中，氮氣吹干，準確參加0.1%醋酸/乙腈+正己烷溶液（1+1）2ml溶解殘渣,1400r/min渦漩混合2min，溶解液轉移入盛有適量psa、c18粉、石墨碳黑粉的離心管中。以1400r/min渦漩混合2min離心。取上清液1ml，置于離心管中氮吹至近干，用正己烷溶解，定容至1ml，過0.22μm濾膜，供gc測定。若樣品為含硫醚類化合物蔬菜[7,8]如蔥、蒜苔等，依據(jù)樣品情況切塊或切段，采用格蘭仕微波爐中火加熱30s，樣品再打碎稱取適量停止提取及凈化。

    　　2.2.3色譜條件

    　　db��1701毛細管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；載氣：高純氮，純度＞99.999%；柱溫：60℃（1.25min）20℃/min180℃(7min)（10℃/min）230℃（7min）（10℃/min）270℃（15min）；柱流速：1.4ml/min，恒流；進樣口溫度：250℃;檢測器：μecd；檢測器溫度：300℃；進樣量：1μl。

    　　3、結果與討論

    　　3.1吸附劑粉末的優(yōu)化選擇

    　　在相同混標溶液中分別參加psa、石墨碳黑、c18、氨基粉等不同的吸附劑粉末處置，每組6個平行樣，所得的回收率數(shù)據(jù)見表1，石墨炭黑粉等去除色素等雜質的效果好，但是對茚蟲威吸附較強、用量要適量，氨基粉與psa凈化效果相同，但氨基粉對多種農(nóng)藥的吸附性均較強，c18和psa對上述13種農(nóng)藥回收率影響較小。所以本實驗選擇psa、石墨碳黑、c18為吸附劑加強凈化效果。表113種農(nóng)藥的混合標準品分別經(jīng)4種吸附劑處置后的回收率（略）

    　　3.213種農(nóng)藥在不同基質中的回收率

    　　吸附劑粉末的用量也是影響前處置效果的重要因素，應依據(jù)樣品情況和目標物性質通過實驗選擇合適的吸附劑用量。關于蔬菜樣品吸附劑粉末用量范圍一般為：psa粉100～200mg、c18粉100～200mg、石墨碳黑50mg。辦法中樣品為菠菜、黃桃、胡蘿卜，樣品色素重，如果僅采用psa，色素及干擾物去除效果不理想，凈化液顏色較深、干擾峰多、基線高，結果難判斷及定量（圖1a）。所以實驗采用150mgpsa、150mgc18、石墨碳黑粉50mg，凈化效果較好，凈化液呈淺色或無色，目標峰附近無大干擾峰（圖1b），添加回收率見表2（濃度為0.01mg/kg）。表213種農(nóng)藥（濃度均為0.01mg/kg）在胡蘿卜、黃桃、菠菜樣品中的回收率。

    　　3.313種農(nóng)藥的保留時間、線性范圍、相關系數(shù)及檢出限

    　　取系列濃度的混合標準工作液，依次進樣，以色譜峰面積對濃度作標準曲線，得13種農(nóng)藥的線性方程及相關系數(shù)，在0.05～10mg/l之間線性關系良好。表313種農(nóng)藥保留時間、線性范圍、相關系數(shù)和檢出限。

    　　3.4辦法回收率、精密度

    　　在已知不含農(nóng)藥殘留的菠菜樣品中分別參加不同濃度的混合標準工作液(a、b、c３組的混標溶液)，按本辦法停止提取、凈化和檢測，以峰面積計算各種農(nóng)藥在0.002～0.05mg/kg添加水平的回收率（同一水平樣品組n=6），計算各農(nóng)藥的平均回收率及相對標準偏差(見表4)，標準品譜圖見圖2（0.1mg/l）、添加回收譜圖見圖4（0.01mg/kg）,氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯在本實驗中所采用的db1701的色譜柱上不能完全別離，但在db��5色譜柱上可完全別離。辦法檢出限為：氟蟲腈、環(huán)氟菌胺均為0.002mg/kg;苯氧菊酯、甲草胺、乙草胺均為0.004mg/kg；多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威均為0.01mg/kg，完全滿足蔬菜中農(nóng)藥殘留量的檢測請求。表413種農(nóng)藥的回收率實驗結果。

    　　3.5小結

    　　本辦法用分散型固相萃取�矚庀嗌�譜法對蔬菜中的乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯等13種殘留停止檢測。依據(jù)蔬菜樣品情況及目標物性質選擇多種吸附劑粉搭配運用，并對其用量停止實驗確定。此凈化辦法減少了雜質干擾，色譜峰別離度好，具有良好的精密度及較低的辦法檢測低限。通過對100批樣品的檢測和協(xié)作實驗室驗證了本辦法的實用性。